分子生物学重组蛋白表达视频教程基因工程哺乳动物细胞重组蛋白工程哺乳动物细胞表达体系建立关键技术课程

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原核表达——起源和分类

原核表达起源——大肠杆菌

1973年，Boyer和Cohen首次完成外源基因在大肠杆菌中的表达，

在实验室里实现了基因转移，为基因工程开启了通向现实应用的大门。

(Construction of biologically functional bacterial plasmids in vitro )

1982年，第一个基因工程产品-利用大肠杆菌生产人胰岛素获得成功(Lilly )，

从此人类进入了生物技术的产业时代.

原核表达分类——大肠杆菌(G-)是肠道中最主要且数量最多的一种细菌，周身鞭毛，能运动，无芽孢。

大肠埃希氏菌(E.coli)通常被称为大肠杆菌，是Escherich在1885年发现的，

在相当长的一段时间内，一直被当作正常肠道菌群的组成部分，认为是非致病菌。

直到20世纪中叶，才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性，

尤其对婴儿和幼畜（禽），常引起严重腹泻和败血症，它是一种普通的原核生物，

大肠杆菌属于革兰氏阴性细菌(G- ) 。

大肠杆菌作为外源基因表达的宿主，遗传背景清楚，技术操作简单，培养条件简单，

大规模发酵经济，倍受遗传工程专家的重视。目前大肠杆菌是应用最广泛，

最成功的表达体系，常做高效表达的首选体系。出于生物安全考虑，

生物工程用的菌株是在不断筛选后被挑选出的菌株。

这些菌株由于失去细胞壁的重要组分，所以在自然条件下已无法生长。

大肠杆菌更适合原核基因的表达，外源基因表达产量与单位体积产量是正相关的，

而单位体积产量与细胞浓度和每个细胞平均表达产量呈正相关，

细胞浓度与生长速率，外源基因拷贝数和表达产物产量之间存在动态平衡，

单个细胞的产量又与外源基因拷贝数，基因表达效率，

表达产物的稳定性和细胞代谢负荷等因素有关。

第—节:原核表达概述(只做最高性价比)【三味教育】 .flv

第二节:载体(只做最高性价比)【三味教育】 .flv

第三节:标签蛋白(只做最高性价比)【三味教育】.flv

第四节:菌株和培养基(只做最高性价比)【三味教育】.flv

第五节:实例演示(只做最高性价比)【三味教育】.flv

第六节:酵母表达系统概述(只做最高性价比)【三味教育】.flv

第七节:昆虫细胞表达系统概述【三味教育】.flv

第八节:哺乳动物细胞表达系统概述（微只做最高性价比)【三味教育】 .flv

重组蛋白表达系统第八章(只做最高性价比)【三味教育】 .pdf

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