分子生物学重组蛋白表达视频教程讲解目录
原核表达——起源和分类
原核表达起源——大肠杆菌
1973年,Boyer和Cohen首次完成外源基因在大肠杆菌中的表达,
在实验室里实现了基因转移,为基因工程开启了通向现实应用的大门。
(Construction of biologically functional bacterial plasmids in vitro )
1982年,第一个基因工程产品-利用大肠杆菌生产人胰岛素获得成功(Lilly ),
从此人类进入了生物技术的产业时代.
原核表达分类——大肠杆菌(G-)是肠道中最主要且数量最多的一种细菌,周身鞭毛,能运动,无芽孢。
大肠埃希氏菌(E.coli)通常被称为大肠杆菌,是Escherich在1885年发现的,
在相当长的一段时间内,一直被当作正常肠道菌群的组成部分,认为是非致病菌。
直到20世纪中叶,才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性,
尤其对婴儿和幼畜(禽),常引起严重腹泻和败血症,它是一种普通的原核生物,
大肠杆菌属于革兰氏阴性细菌(G- ) 。
大肠杆菌作为外源基因表达的宿主,遗传背景清楚,技术操作简单,培养条件简单,
大规模发酵经济,倍受遗传工程专家的重视。目前大肠杆菌是应用最广泛,
最成功的表达体系,常做高效表达的首选体系。出于生物安全考虑,
生物工程用的菌株是在不断筛选后被挑选出的菌株。
这些菌株由于失去细胞壁的重要组分,所以在自然条件下已无法生长。
大肠杆菌更适合原核基因的表达,外源基因表达产量与单位体积产量是正相关的,
而单位体积产量与细胞浓度和每个细胞平均表达产量呈正相关,
细胞浓度与生长速率,外源基因拷贝数和表达产物产量之间存在动态平衡,
单个细胞的产量又与外源基因拷贝数,基因表达效率,
表达产物的稳定性和细胞代谢负荷等因素有关。
第—节:原核表达概述(只做最高性价比)【三味教育】 .flv
第二节:载体(只做最高性价比)【三味教育】 .flv
第三节:标签蛋白(只做最高性价比)【三味教育】.flv
第四节:菌株和培养基(只做最高性价比)【三味教育】.flv
第五节:实例演示(只做最高性价比)【三味教育】.flv
第六节:酵母表达系统概述(只做最高性价比)【三味教育】.flv
第七节:昆虫细胞表达系统概述【三味教育】.flv
第八节:哺乳动物细胞表达系统概述(微只做最高性价比)【三味教育】 .flv
重组蛋白表达系统第八章(只做最高性价比)【三味教育】 .pdf
重组蛋白表达系统第二章(只做最高性价比)【三味教育】 .pdf
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